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懸浮細胞不易轉染怎么辦?
閱讀次數(shù):800 發(fā)布時間:2021/8/19 11:28:12
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懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。

目大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因導入細胞內(nèi),而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。

為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如engreen的Entranster試劑,納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,好選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到低,如Entranster-E。

懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。



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