詳細內容
中文名稱:HighFive昆蟲細胞(保成活)
產品規(guī)格:1支
產地:國產
產品用途:用于桿狀病毒增殖和重組蛋白表達
誘導方法:桿狀病毒誘導
細胞適用范圍:
可用于 Express Five®SFM。High Fiv昆蟲細胞 (BTI-TN-5B1-4) 是從親代 Trichopulsia ni 細胞系分離得到的克隆,通常用于使用桿狀病毒表達載體系統(tǒng) (BEVS) 的重組蛋白表達。 這種細胞能在 Express Five® SFM 中進行無血清懸浮培養(yǎng),顯著節(jié)省了與無血清和/或懸浮培養(yǎng)時的培養(yǎng)物馴化相關的時間和經費。 Express Five® SFM 是使High Five細胞實現佳生長和重組基因表達的優(yōu)化無蛋白昆蟲細胞培養(yǎng)基。
HighFive昆蟲細胞 應用: 用于桿狀病毒擴增和重組蛋白表達。
進行如下測試: 檢驗每個批次從超低溫冷凍法回收后的生長和活力,并測試其是否含有支原體。
保存注意事項:
(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
(2)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。
(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。
(4)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾,切勿直接過濾血清。
(5)血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量。可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下"小黑點":經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。
(6)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破會而影響血清質量。
原創(chuàng)作者:上海遠慕生物科技有限公司
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