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油紅 O 異丙醇飽和溶液
產品簡介:
脂質(Lipid)是中性脂肪、 類脂及其衍生物的總稱, 其共同的物理特性是不溶于水, 易溶于有機溶劑(如乙醇、等)。人體的脂肪主要有兩種:1、儲存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。2、結構脂肪,如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等),主要分布于細胞內。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,呈中性。中性脂肪是儲存能量的方式,在氧化時釋放出能量。在正常情況下,除脂肪細胞外,其他細胞在光學顯微鏡下幾乎看不到脂滴, 如果細胞質內出現(xiàn)大量脂滴即為脂肪變性, 常見于肝細胞、心肌細胞、腎曲管上皮細胞等。
中性脂肪染色經常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑 B、油紅 O 法等。傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料,*近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅 O 更適合脂肪的染色。油紅 O 是很強的脂溶劑和染脂劑,較易與甘油三脂結合呈小脂滴狀,與磷脂結合力稍差。其染色原理一般認為是物理上的溶液作用或吸附作用, 借溶液作用使脂肪染色。 染料在冰凍切片內脂質的溶解度較原溶劑中的溶解度更大,所以在染色時染料就從有機溶劑轉移入脂質而使脂肪染色。
紅 O 染色主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質的異常沉著,常發(fā)生
于肝、腎、心等實質臟器的脂肪變性,細胞內出現(xiàn)多數中性脂肪滴;鑒別和診斷脂肪組織中所發(fā)生的腫瘤及其性質。標本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用 10%福爾馬林)、也不采用石蠟切片, 需用冰凍切片或碳蠟切片。脂肪的陽性染色結果呈橘黃至紅色, 但具體顏色因脂質濃度而定。
產品組成:
名稱
規(guī)格 |
100ml |
Storage |
油紅 O 異丙醇飽和溶液 | 100ml | RT |
使用說明書 | 1 份 |
自備材料:
1、60%異丙醇
2、蒸餾水
3、Mayer 蘇木素染色液
4、1%鹽酸溶液
5、甘油明膠或阿拉伯糖膠
操作步驟(僅供參考):
1、 按油紅 O 異丙醇飽和溶液:蒸餾水=1:4 比例配制油紅 O 染色工作液。
2、 冰凍切片厚度 6~10mm,不固定或 10%福爾馬林固定 10min 后水洗。
3、 切片入蒸餾水中稍沖洗。
4、 切片入 60%異丙醇浸洗 20~30s。
5、 切片入油紅 O 染色工作液(加蓋),密閉染色 10~15min。
6、 分色: 入 60%異丙醇內稍洗以便去除染液。
7、 入蒸餾水中稍微清洗。
8、 入 Mayer 蘇木素染色液,復染核 1~2min。
9、 (可選)1%鹽酸溶液稍微分化一下。
10、 (可選)自來水漂洗 10min 或稀碳酸鋰 溶液促藍。
11、 入蒸餾水稍微清洗。
12、 用濾紙吸干周圍水分。
13、 甘油明膠或阿拉伯糖膠封固。
染色結果:
中性脂肪 | 橙紅色或橘紅色 |
細胞核 | 藍色 |
注意事項:
1、 油紅 O 染色工作液不夠穩(wěn)定,易產生沉淀,不宜提前配制。
2、 如果 60%異丙醇不易獲得,亦可采用 70%乙醇。
3、 由于脂肪易溶于有機溶劑,顯示脂肪一般不能像石蠟切片一樣處理,而通過冰凍切片 染色來顯示。
4、 作為脂肪染色的冰凍切片不可太薄,過薄的切片常會使脂質丟失。
5、 Mayer 蘇木素染色液復染時間不能過長。
6、 染色結果不能長期保存,應盡快觀察及照相。
7、 甘油明膠封固的樣本,保存時間不長。如需長期保存,可以在蓋玻片與載玻片交界的邊緣用中性樹膠封閉。
8、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
儲存條件:6 個月有效。
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