牛血清白
蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含607個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用。
是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白。纖維粘連素細(xì)胞促進(jìn)細(xì)胞附著;α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用;胎牛血清中含胎球蛋白促細(xì)胞附著;轉(zhuǎn)鐵蛋白能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細(xì)胞利用。
折疊多肽
血小板促生長(zhǎng)因子能促細(xì)胞分裂,是多肽家庭的主要成員,是主要的促細(xì)胞增殖因子;成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)因子等,血清中含量雖很少,但對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)也有一定作用。
牛血清中的簡(jiǎn)單蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成,其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.430kDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,例如在westernblot中作為Blockingagent。
牛血清白蛋白的用途:
1、在酶切反應(yīng)緩沖液中加入BSA,通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對(duì)酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,減輕不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學(xué)因素引起的變性的。
2、ELISA中也常常用到,比如封閉液,樣本稀釋液,酶結(jié)合物稀釋液都可以用BSA。
3、生化研究,遺傳工程和藥物研究。
牛血清白蛋白的儲(chǔ)備方式:
每10克加100毫升水進(jìn)行溶解,或用 PBS溶解也可,視用途而決定。然后分裝成小支。若不使用防腐劑可貯存在零下20或30攝氏度的恒溫柜中,若使用防腐劑則可貯存在零上4攝氏度的環(huán)境下。一般可存放數(shù)月不變質(zhì)。防腐劑可能對(duì)牛血清白蛋白的效果造成影響,應(yīng)慎用。
在免疫試驗(yàn)中常用作封閉劑包括ELISA、WB(Western Blot)。作為載體蛋白,將其交聯(lián)于半抗原和其他弱抗原可以使它們?cè)?a target="_blank" href="http://m.pearlnet.cn/Products/T487239.html" title="抗體" >抗體生產(chǎn)中具有更強(qiáng)的免疫原性。在限制性內(nèi)切酶消化反應(yīng)中,BSA常常被用作一些酶的反應(yīng)穩(wěn)定劑,并且能防止它粘附到管壁和槍頭上。BSA也常用于生物制藥的生產(chǎn)過程或者作為營養(yǎng)物用于細(xì)胞和微生物培養(yǎng)。除此之外,還作為蛋白定量檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品使用。
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