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（1）抗原：免疫動物是制備抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、細(xì)菌或者其他蛋白質(zhì)抗原，如果使用半抗原如小分子激素等，必須與大分子載體連接。抗原的用量視抗原種類及動物而異，—次注射小鼠可以少至幾個微克，免、羊甚至更大的動物每次注射的量就相應(yīng)增加，從幾百μg/次至幾mg/次。

〔2）佐劑及乳化：佐劑可以幫助抗原在注射部位緩慢釋放，以增加免疫刺激的效果。佐劑有完全和不完全佐劑之分。完全佐劑加有滅活的分枝桿菌（如卡介苗）或棒狀桿菌。福氏佐劑可從試劑公司購買，也可用羊毛脂和石蠟油按1：2—4混合自行制備。佐劑與抗原按1：1的比例混合乳化為均勻的乳液，放置后不會發(fā)生油水分離。

（3）免疫動物：常用于制備抗血清的動物打豚鼠、家免、小鼠、大鼠等，如果大量生產(chǎn)可用動物羊、馬等，動物接受免疫的乳液量小鼠為1.0—2.0 mL，家兔為2—4mL.抗原免疫動物的途徑取決于動物種類、抗原特性和是否使用佐劑。醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理腹腔注射（i.p），肌肉注射（i.m），皮內(nèi)注射（i.d.）和皮下注射（s.c.）適合于任何抗原，這些途徑主要刺激局部淋巴結(jié)發(fā)生免疫應(yīng)答，初次免疫和免疫加強(qiáng)注射均可使用。靜脈注射（i.v.）則只適合于可溶性抗原及分散的單細(xì)胞懸液，且不能使用佐劑，其誘發(fā)的免疫應(yīng)答主要發(fā)生在脾臟。此外，在單克隆抗體制備時，亦可用脾臟直接注射或體外免疫方法，尤其對微量抗原比較實(shí)用。體外免疫方法也常用于人源單克隆抗體的制備。體外免疫時將脾細(xì)胞或外周血淋巴細(xì)胞（包括B細(xì)胞，T細(xì)胞及抗原遞呈細(xì)胞）與抗原一起作體外培養(yǎng)，然后再與骨髓瘤細(xì)胞融合。初次免疫后要經(jīng)過2—3次以上的免疫加強(qiáng)以保證能形成較高水平的IgC抗體。兩次免疫注射之間的時間間隔，一般3—4周比較適合大部分動物，小動物可間隔10—14d，大動物則在2月左右。在免疫加強(qiáng)后一次注射后的一周內(nèi)采集抗血清，可獲得高水平的抗體。

原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司