如何促進細胞貼壁
1. 適度消化細胞：HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理5-6min，C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落，2min足矣，P19Cl6和293細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
2. 好用塑料瓶培養(yǎng)，如果是玻璃瓶,那么可以用鼠尾膠原包被一下培養(yǎng)瓶，或者用鹽酸對培養(yǎng)瓶進行蝕刻，或者涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA，也可以幫助細胞貼附新的培養(yǎng)瓶，細胞不易貼壁，建議加多聚賴氨酸處理。
3. 正確配制消化液或培養(yǎng)液。
4. 使用合適的細胞外基質(zhì)或貼壁試劑。
5. 復(fù)蘇新的細胞，DI 一周用20%血清幫助細胞復(fù)原。
6. 傳代接種一定要鋪的均勻，避免細胞抱團生長。
7. 細胞傳代24小時之內(nèi)，不要晃動，以免影響貼壁。
8. 體內(nèi)上皮細胞生長在膠原構(gòu)成的基膜上，因此培養(yǎng)在有膠原的底物上有利于生長。人或小鼠表皮細胞培養(yǎng)，可以用γ射線照射后的3T3細胞為飼養(yǎng)層，另外降低pH、Ca2+含量和溫度，均有利于上皮細胞生長。
細胞培育的關(guān)鍵
一、萬物的成長離不開水，細胞也是相同的，若要它成長，有必要要用新鮮的雙蒸水，不含任何雜質(zhì)和有離子等成分。
二、PBS（也可用BBS、如：Hanks D-Hanks液裝備）-此產(chǎn)品主要用于免疫組化染色時安排或細胞的漂洗。Sciencell的DPBS（SicenCell No.0303）是一種無毒、無滲合物的緩沖液，它不包括Ca2 +, Mg2 和酚紅而且經(jīng)過0.2μm過濾消毒，可用于沖刷細胞而不會造成損害。
三、胰
蛋白酶的效果是使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。不同的安排或許細胞對胰酶的效果反響不相同，胰酶渙散細胞的活性還與其濃度、溫度和效果時刻有關(guān)，在PH值為8.0，溫度為37度時，胰酶溶液的效果才能qiang。所以使用胰酶時。應(yīng)當掌握好時刻，濃度和溫度。
四、內(nèi)皮細胞觸及多個血管生物學(xué)的范疇，是很多科研研究的熱門，它不僅能完結(jié)血漿和安排液的代謝交流，而且能合成和排泄多種生物活性物質(zhì)，以確保血管正常的縮短和舒張，起到維持血管張力，調(diào)節(jié)血壓以及凝血與抗凝平衡等特殊功能，從而堅持血液的正常流動和血管的長時間通暢。
五、 原代細胞凍存很關(guān)鍵 ，由于一不留神就會復(fù)蘇不活 ，一凍回到解放，DMSO是常用的凍存細胞的試劑，但是由于其具有揮發(fā)性，毒性，不好掌控，而導(dǎo)致很多科研者在細胞凍存之后自我感覺凍存沒有問題，但是復(fù)蘇起來卻一個活細胞也見不著。
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
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