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麗春紅（Ponceau S）也稱猩紅，可以用于PVDF膜、硝酸纖維素膜（nitrocellulose membrane）和醋酸纖維素膜（cellulose acetate membrane）上的蛋白的檢測(cè)。麗春紅帶負(fù)電荷，可以與帶正電荷的氨基酸殘基結(jié)合，同時(shí)麗春紅也可以與蛋白的非性區(qū)相結(jié)合，從而形成紅色的條帶。麗春紅染色的靈敏度不及考馬斯亮藍(lán)染色。

麗春紅對(duì)蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸餾水，PBS或其它適當(dāng)溶液洗去。因此，蛋白質(zhì)N端測(cè)序時(shí)將SDS-PAGE膠上的蛋白轉(zhuǎn)移到PVDF膜，用麗春紅染色后將目的條帶切下用于測(cè)序。

注意：麗春紅染色液不適用于尼龍膜上的蛋白的檢測(cè)。

麗春紅染色液的配制

常用的麗春紅染色液有兩種：一種用乙酸配制，另外一種用三lv乙酸（TVA）和5-磺基水楊酸（5-Sulfosalicylic acid）配制。配制方法如下：

一、用乙酸配制成分：0.1%（w/v）麗春紅，5%（v/v）乙酸，ddH2O。

4 ℃保存，不要凍上。也可以配成“0.2%（w/v）麗春紅，3%（v/v）乙酸，ddH2O”。

二、用三lv乙酸和5-磺基水楊酸成分：2% （w/v）麗春紅，30%的三lv乙酸，30%的5-磺基水楊酸。

麗春紅染色液使用說明

將PVDF膜、硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜浸沒在麗春紅染色液中，搖動(dòng)5-10分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間；取出印跡膜，用蒸餾水，PBS或其它適當(dāng)溶液漂洗2-3次，可出現(xiàn)清晰條帶，記錄結(jié)果；用蒸餾水，PBS或其它適當(dāng)溶液漂洗2-3次，每次3-5分鐘，去除麗春紅，進(jìn)行后續(xù)的WB檢測(cè)。

補(bǔ)充：麗春紅染色液也可以直接用來染PAGE膠，不過，在染色之/好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下PAGE膠，起到固定蛋白的作用。

原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司