原代細胞(primary cell)是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)
蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細胞，稱為原代細胞。
細胞系(cell line)是原代細胞經(jīng)-次傳代成功后即為細胞系。泛指一般可能傳代的細胞。其中能夠連續(xù)傳代的細胞叫做連續(xù)細胞系或無限細胞系，不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細胞系。
大多數(shù)細胞系已經(jīng)經(jīng)過了數(shù)十年的培養(yǎng)，雖然它們還能很好的適應二維培養(yǎng)環(huán)境，但這些細胞系通常在遺傳學和表型上與其起源組織起源細胞不同，甚至形態(tài)有改變。
然而，原代細胞不存在這些問題，他們通常是直接從組織中分離的、具有有限壽命和有限增值能力的細胞，因此原代細胞擁有正常細胞的形態(tài)，并且能夠體現(xiàn)出該細胞在生物體內所應該具備的標記和功能。例如內皮細胞系常缺乏各種功能性標志蛋白的表達，而原代內皮細胞具有這些關鍵特征。
與細胞系相反，原代細胞是非常敏感的細胞，需要傳統(tǒng)培養(yǎng)基之外的額外營養(yǎng)物質。為了優(yōu)化原代細胞的存活和生長，需要針對每種細胞類型選擇特定的培養(yǎng)基。例如，內皮細胞對營養(yǎng)的需求與上皮細胞或神經(jīng)元有很大區(qū)別，因此需要特制的內皮細胞培養(yǎng)基。
而傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)基依靠血清提供生長因子、激素、脂質和其他的未知組分，以支持細胞的生長。但對于原代細胞，高血清水平可導致細胞分化，或促進污染細胞如成纖維細胞的生長。
此外，添加血清也受到成本上升及不同批次間差異性的困擾。配制具有很少或沒有血清的特殊培養(yǎng)基則可以避免這些問題，并且更加有利于促進特定類型原代細胞的生長。而且，其他一些實踐，例如在更多的生理學相關底物上接種原代細胞而不是使用合成聚合物，可以顯著的促進細胞貼壁、增殖及保持純度。
盡管原代細胞可能更難培養(yǎng)，但是使用原代細胞而獲得的數(shù)據(jù)具有更好的相關性，并且更能反映體內環(huán)境。
原代細胞：從體內直接分離的細胞。功能、代謝、形態(tài)類似體內細胞的特點，因此原代細胞適用于分析單個細胞形態(tài)、代謝、功能。原代細胞的缺點是：細胞均一性差，因為從特定組織取下來的原代細胞可能處于不同的發(fā)育時期。增殖能力差、培養(yǎng)時間受限、轉染效率低。
細胞株：原代細胞經(jīng)過長-期培養(yǎng)和篩選后，功能、代謝、形態(tài)趨于均一化的無限增殖細胞。適用于整體水平實驗。優(yōu)點是：容易培養(yǎng)、好感染、干擾因素少、便于同步化、實驗好操作。缺點是：與整體差別大、可能喪失原代細胞的特性，細胞株在長-期傳代過程中遺傳物質發(fā)生變異。所以同一個學名的細胞株，有可能有完-全不同的形態(tài)、代謝、功能表現(xiàn)。不同代數(shù)的細胞株，性質也可能完-全不同。
原代細胞由于轉染效率低這個問題，應用受到了限制。自從腺病毒誕生后，因為其超強的感染能力，克服了原代細胞難感染的問題，使得原代細胞的使用變得更加簡單。由于細胞實驗后，很多時候需要做到動物體內，由于原代細胞有體內細胞的特點，為了細胞實驗和動物體內實驗的結果更加趨向一致性，因此用原代細胞來進行細胞實驗更值得考慮。
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
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