可以說，到目前為止，針對體外
細(xì)胞培養(yǎng)的支原體檢測的方法還沒有一種單獨(dú)使用就可以保證100%正確，既不會(huì)漏檢（假陰性），也不會(huì)多檢（假陽性）。
（1）支原體固體培養(yǎng)法。通過固體培養(yǎng)法無法檢測污染細(xì)胞的一種*常見的支原體，即豬鼻支原體（M.Hyorhinis）。這是因?yàn)樨i鼻支原體無法在支原體固體
培養(yǎng)基上形成可見的菌落，而豬鼻支原體約占所有支原體污染的20-50%。這就意味支原體固體培養(yǎng)法漏檢率高達(dá)20-50%。
（2）PCR法。PCR法導(dǎo)致的假陽性大家比較熟悉，無需多說。值得注意的是，由于細(xì)胞培養(yǎng)液中，經(jīng)常會(huì)含有強(qiáng)烈抑制PCR擴(kuò)增的代謝產(chǎn)物，如果不進(jìn)行樣品的前處理而直接使用細(xì)胞培養(yǎng)原液進(jìn)行PCR檢測，產(chǎn)生假陰性的概率是非常大的。
（3）熒光染色法。由于該方法本身的靈敏度較低，輕度的支原體污染往往無法檢測出來。該方法漏檢率也不會(huì)低。
（4）檢測支原體特異性酶的方法，比如Lonza公司的MycoAlert Plus Mycoplas Detection Kit和上海遠(yuǎn)慕生產(chǎn)的《發(fā)光法支原體檢測
試劑盒》。主要缺點(diǎn)是發(fā)光值有一定的波動(dòng)，處于檢測下限邊緣的讀值可能會(huì)造成誤判。
（5）《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》該方法盡管有許多優(yōu)點(diǎn)，但是目前為止，我們只能保證該試劑盒能檢測出說明書上列舉的13種支原體，雖然這13種支原體大約占了所有污染細(xì)胞的支原體種類的99%左右，但是該方法也不能保證100%的支原體檢出率。
綜上所述，單獨(dú)使用目前市面上的任何一種支原體檢測試劑盒，都無法做到100%正確，既不會(huì)漏檢（假陰性），也不會(huì)多檢（假陽性）。嚴(yán)格的支原體檢測，至少需要使用兩種，使用三種不同原理的支原體檢測方法同時(shí)進(jìn)行檢測，才能使檢測結(jié)果接近100%正確。
如果您想得到100%正確的支原體檢測結(jié)果（比如，開展細(xì)胞治療的客戶，進(jìn)行干細(xì)胞培養(yǎng)的客戶，生產(chǎn)血清、胰酶、培養(yǎng)液的客戶，出售各種原代培養(yǎng)細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞系的客戶等），任選本公司生產(chǎn)的《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》、《PCR法支原體檢測試劑盒》、《發(fā)光法支原體檢測試劑盒》和《探針法支原體檢測試劑盒》中的兩種進(jìn)行檢測，將會(huì)得到比較滿意的結(jié)果。如果幾種不同支原體檢測方法的檢測結(jié)果一致，正確率幾乎就是100%
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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