抗體,是我們非常熟悉的一種生物試劑, 但我們對抗體的鑒定,選擇又了解多少呢某著名抗體公司的科學(xué)家在行業(yè)內(nèi)提出全新的抗體選擇標(biāo)準(zhǔn)“PASS”。通過客觀的參數(shù)指標(biāo)和專家的觀點,科研人員只需要仔細(xì)的閱讀抗體的說明書,再結(jié)合 “PASS”的抗體選擇標(biāo)準(zhǔn),就可以在一定程度上自己鑒定選擇抗體的品質(zhì)。
“PASS”抗體選擇標(biāo)準(zhǔn)是指科研人員在選擇抗體的時候,應(yīng)留意抗體說明書中抗體純化工藝(Purification),抗原信息(Antigen),抗體的特異性(Specificity)以及抗體的種屬來源(Species)這四個方面的相關(guān)信息。
Purification
抗體的優(yōu)劣,包括特異性,效價等方面和生產(chǎn)抗體過程中使用的純化工藝是直接相關(guān)。但科研人員在選擇抗體的時候去常常忽略這個方面。
在行業(yè)內(nèi),使用
蛋白A或G純化單克隆抗體的方法被廣泛接受。那么,多克隆抗體純化工藝呢?
很多公司都使用親和純化(affinity purification)的方法來純化多克隆抗體,該技術(shù)的關(guān)鍵在于使用的親和原(affinity ligand)。 為了得到效價更高,特異性更好的抗體,一流的抗體公司盡可能使用全蛋白做為親和原去得到優(yōu)質(zhì)的抗體,而且常常還會進(jìn)行第二
步的蛋白A或G的分化。相反,使用多肽作為親和原,純化到的多抗表位有限,多抗的效價和特異性都會大打折扣。因此, 一流的抗體公司的多克隆抗體的效價,特異性的優(yōu)勢明顯,而且很多多克隆抗體可以用于中和和阻斷實驗。
目前用于抗體生產(chǎn)的抗原主要有兩種:一種是使用
儀器合成的不具備生物活性的多肽。使用多肽作為抗原的有三個缺點:
(1) 使用多肽來源的抗體所做的實驗結(jié)果重復(fù)性較差;
(2) 因為很多公司并不提供作為抗原的多肽序列信息,因此對發(fā)表論文或者科研數(shù)據(jù)方面都有潛在的風(fēng)險;
(3) 一般而言,較活性全蛋白來源的抗體,多肽來源的抗體的特異性和效價都比較低。一流的抗體公司堅持使用具有活性的全蛋白作為抗原,由此得到的抗體效價,特異性和可重復(fù)性方面更勝一籌。由此得到的抗體自然識別樣本的能力和準(zhǔn)確性也更高。
專家觀點
科研人員認(rèn)為對于那些不提供多肽信息的抗體,科學(xué)界是應(yīng)該抵制的。
原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司