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上海遠(yuǎn)慕詳解—肝素-瓊脂糖凝膠說明書
閱讀次數(shù):882 發(fā)布時(shí)間:2016/9/30 10:58:37
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上海遠(yuǎn)慕詳解—肝素-瓊脂糖凝膠說明書


肝素-瓊脂糖凝膠

1 簡介 

肝素是一種含硫酸酯的酸性多糖,將它偶聯(lián)到交聯(lián)及活化的瓊脂糖凝膠上,該填料具有很高的物理化學(xué)穩(wěn)定性。 

肝素能和抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干擾素、核酸結(jié)合蛋白、限制內(nèi)切酶、凝血酶及類凝血酶等生物大分子結(jié)合,所以肝素瓊脂糖凝膠可以用于這類物質(zhì)的純化。 

本產(chǎn)品穩(wěn)定性好,基團(tuán)脫落少,使用壽命長,使用方便,應(yīng)用廣泛。 

2 親和填料特性 

特點(diǎn) 

基團(tuán)脫落少,結(jié)合特異性強(qiáng) 

基質(zhì) 

6%的交聯(lián)瓊脂糖凝膠 

配基 

肝素 

配基密度 

5mg/ml 

吸附載量 

2-3mg 抗凝血因子Ⅲ(AT Ⅲ )/ml 

親和填料的顆粒大小 

45-165μm 

流速 

300cm/h 

pH范圍 

4-10,在位清洗時(shí)pH范圍可到3-13 

使用溫度 

4℃~常溫 

保存溫度 

+4~8℃ 

保存液體 

20%乙醇 

3 適用范圍 

肝素瓊脂糖凝膠用于抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干擾素、核酸結(jié)合蛋白、限制內(nèi)切酶、凝血酶及類凝血酶等生物大分子的分離純化。

4 親和填料應(yīng)用的注意事項(xiàng): 

(1)該凝膠從冷室或冰箱中取出后在室溫下緩慢振搖恢復(fù)到室溫,然后再裝柱,以免產(chǎn)生氣泡影響柱效; 

(2)吸附:20-50mM,pH7.4-8.0的緩沖液,為避免離子交換的干擾,緩沖液中可以適當(dāng)加50mM-100mM的NaCl,,*常用的為Tris-HCl緩沖液; 

(3)洗脫:可以用pH7.4-8.0的緩沖液加0.2-2M進(jìn)行階段或者線性洗脫;

(4)上樣樣品必須與平衡柱子的緩沖液的pH、電導(dǎo)相同; 

(5)不同的樣品,吸附和洗脫方法不相同,可以根據(jù)相關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行;

(6)肝素瓊脂糖凝膠親和填料的再生處理方法:先用0.1M Tris-HClpH7.0緩沖液洗3個柱床體積,然后用0.1M NaOH含2MNaCl流洗3個床體積,*后用20%乙醇洗 3個床體積即可。長時(shí)間用酸堿洗填料會是填料的吸附能力下降,所以清洗要盡量縮短時(shí)間; 

(7)該親和填料保存條件為20%乙醇,4-8℃。 

原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

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