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【實驗人必看】微生物檢測無菌室操作規(guī)程!
閱讀次數(shù):439 發(fā)布時間:2022/9/7 13:25:05
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   1.無菌室應設有無菌操作間和緩沖間,無菌操作間潔凈度應達到10000,室內(nèi)溫度保持在20-24℃,濕度保持在45-60%。超凈臺潔凈度應達到100。
 
  2.無菌室應保持清潔,嚴禁堆放雜物,以防污染。
 
  3.嚴防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染,已污染者應停止使用。
 
  4.無菌室應備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。
 
  5.無菌室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔,以保證無菌室的潔凈度符合要求。
 
  6.需要帶入無菌室使用的儀器,器械,平皿等一切物品,均應包扎嚴密,并應經(jīng)過適宜的方法滅菌。
 
  7.工作人員進入無菌室,必須用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在緩沖間更換用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手),方可進入無菌室進行操作。
 
  8.無菌室使用必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上,并且同時打開超凈臺進行吹風。操作完畢,應及時清理無菌室,再用紫外燈輻照滅菌20分鐘。
 
  9.供試品在檢查,應保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢查,用70%的酒精棉球消毒外表面。
 
  10.每次操作過程中,均應做陰性對照,以檢查無菌操作的可靠性。
 
  11.吸取菌液時,必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管。
 
  12.接種針每次使用后,必須通過火焰灼燒滅菌,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。
 
  13.帶有菌液的吸管,試管,培養(yǎng)皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒,24小時后取出沖洗。如有菌液灑在桌上或地上,應立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘,再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時,應立即脫去,高壓蒸汽滅菌后洗滌。
 
  15.凡帶有活菌的物品,必須經(jīng)消毒后,才能在水龍頭下沖洗,嚴禁污染下水道。無菌室應每月檢查菌落數(shù)。在超凈工作臺開啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無菌培養(yǎng)皿若干,無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15ml,放至凝固后,倒置于30~35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時,證明無菌后,取平板3~5個,分別放置工作位置的左中右等處,開蓋暴露30分鐘后,倒置于30~35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時,取出檢查。100潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個菌落,10000潔凈室平均不得超過3個菌落。如超過限度,應對無菌室進行徹底消毒,直至重復檢查合乎要求為止。
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