无码人妻小视频,婷婷成人AV网站,亚洲午夜男女性爱大片,蜜桃Av噜噜一区二区三区四区

公司新聞

如何對pcr擴增電泳條帶分析
閱讀次數(shù):626 發(fā)布時間:2022/3/10 13:36:53
分享到:
 
  PCR擴增后一般進行瓊脂糖凝膠電泳分析,電泳后一般有以下幾種條帶:

  1、引物帶。引物濃度過高或是擴增效率不是特別高時都會有,一般不呈現(xiàn)為細帶,為發(fā)散狀;如果目的擴增產(chǎn)物帶和引物帶都很亮,可以考慮適當(dāng)降低引物量。

  2、引物二聚體帶。比引物跑得慢一點,條帶清晰,但如果擴增產(chǎn)物小于100bp時,產(chǎn)物與引物二聚體就不好分別了,建議采用DNA聚丙烯/酰胺電泳(不是蛋白質(zhì)的SDS聚丙烯/酰胺電泳);如果引物二聚體在優(yōu)化復(fù)性溫度后仍然嚴(yán)重影響目的產(chǎn)物的擴增,優(yōu)先考慮更換引物設(shè)計(因為引物合成的成本比反復(fù)優(yōu)化條件的成本低)

  3、目的擴增產(chǎn)物帶。其大小與設(shè)計大小相同,條帶清晰。

  4、非特異擴增產(chǎn)物帶。其大小與設(shè)計大小不相同,條帶清晰。一般考慮通過提高復(fù)性溫度來減少或消除(也可用溫度梯度功能來尋找zui佳的復(fù)性溫度,東勝龍811型PCR儀就有此功能)。如果其片段大小比目的片段大較多,可以通過減少延伸時間來減少或消除(即不給它足夠的延伸時間)。還有一種非特異擴增產(chǎn)物帶是來自于逆轉(zhuǎn)錄PCR實驗時的基因組DNA的污染,如果目的擴增產(chǎn)物中有內(nèi)含子,擴增產(chǎn)物很可能大于目的基因。這種條帶通過優(yōu)化復(fù)性溫度是不能消除的,可以在逆轉(zhuǎn)錄用無RNA酶的DNA酶進行樣本處理。

  5、模板DNA帶。模板濃度過高時可能出現(xiàn)。如果是基因組DNA為模板,條帶可能會很亂且較大。一般進行PCR擴增時,模板濃度都不要太大,否則會產(chǎn)生一些比目的基因長一點的雜質(zhì)DNA(可能不成條帶,也看不到),這是由PCR擴增原理造成的。

  那么我們該如何判斷是否擴增成功呢?

  先要點Marker的,對照Marker的條帶,看你擴增出的條帶的大小,是否跟你預(yù)計的條帶大小一致,以此來判斷你的PCR反應(yīng)是否成功。
 
產(chǎn)品搜索

請輸入要搜索的關(guān)鍵詞

聯(lián)系我們
  • 公司名稱:上海遠慕生物科技有限公司
  • 公司地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號
  • 公司電話:021-58999639
  • 公司傳真:021-58999639
  • 聯(lián)系人:俞燕熙
  • 手機:13310162040
  • 網(wǎng)址:www.yuanmubio.com

上海遠慕生物科技有限公司:細胞凍存液,氨芐青霉素溶液,人白介素ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,顯色試劑盒,新生牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,牛血清白蛋白溶液,小鼠血漿,雞紅細胞,透明質(zhì)酸酶溶液,微生物培養(yǎng)基,胰蛋白酶儲存液,兩性霉素B溶液,LB冷凍緩沖液,ABTS試劑,磷酸酶抑制劑,EB緩沖液,熒光染色試劑盒,肥大細胞染色液,人源基因質(zhì)粒,胡蔓藤堿乙標(biāo)準(zhǔn)品,番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品,Pd-C-II標(biāo)準(zhǔn)品,知母皂苷E標(biāo)準(zhǔn)品,穿刺培養(yǎng)基,puc19質(zhì)粒,CPD抗凝劑,熒光抗體稀釋液
地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號 電話:021-58999639 傳真:021-58999639 技術(shù)支持:阿儀網(wǎng) 總訪問量:7612004

在線客服
熱線電話

02158999639

13310162040

工作時間:8:30-18:00

13

阿儀網(wǎng)推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站