彎曲菌是一種常見(jiàn)的導(dǎo)致人類(lèi)腸炎的致病菌,以腹瀉為主要特征,并可從糞便中分離出來(lái)。
培養(yǎng)基.jpg" src="http://www.ym-sw.com/usr/uploads/3/202011/弧菌顯色培養(yǎng)基.jpg" />
ISO于2017年發(fā)布了新版的ISO10272-1:2017標(biāo)準(zhǔn),即《食品鏈的微生物學(xué),彎曲菌屬檢測(cè)和計(jì)數(shù)的水平方法》。其中建議的彎曲菌檢測(cè)方案,依據(jù)樣本類(lèi)型和檢測(cè)目的,分為三種:1)在彎曲菌多的時(shí)候,不需要增菌,用方案C;2)對(duì)于彎曲菌和背景菌都較少的情況,用方案A,例如烹制過(guò)的或低溫食品。取樣后再Bolton肉湯微需氧37℃先培養(yǎng)4-6h,再41.5℃培養(yǎng)44h±4h;3)對(duì)于彎曲菌少,背景菌多的情況,例如生肉、生乳,采用方案B,在Preston肉湯中微需氧41.5℃培養(yǎng)24h±2h。
增菌后,方案A是采用mCCD瓊脂和另一款其選擇劑不同于mCCD的彎曲菌選擇分離培養(yǎng)基來(lái)分離,方案B是采用mCCD瓊脂來(lái)分離。均為微需氧41.5℃培養(yǎng)44h±4h。在mCCD瓊脂上彎曲菌典型菌落為灰色。對(duì)于ISO10272-1:2017中方案A所提到的另一款其選擇劑不同于mCCD的彎曲菌選擇分離培養(yǎng)基,可選擇HiCrome彎曲菌顯色培養(yǎng)基(廠家:HiMedia,貨號(hào)M2020,配合彎曲菌選擇性添加劑(貨號(hào)FD178)一起使用)。該顯色培養(yǎng)基含有復(fù)合
蛋白胨、氯化鈉、多種顯色劑、生長(zhǎng)因子和瓊脂。適用于食品樣本和臨床樣本。培養(yǎng)基配好為在平皿中為黃色透明至輕微不透明凝膠。35-37℃孵育24-48小時(shí)后,彎曲菌菌落為淡紫色(下圖),回收率≥50%。而金葡菌和大腸埃希菌均被抑制。
傳統(tǒng)的彎曲菌培養(yǎng)基,是使用改良的黑色活性炭頭孢哌酮脫氧膽酸瓊脂(mCCDA)。但彎曲菌菌落在黑色的培養(yǎng)基上為無(wú)色,通常很難檢測(cè)到。而HiCrome彎曲菌顯色培養(yǎng)基在mCCDA培養(yǎng)基基礎(chǔ)上研發(fā)出來(lái),其鑒別能力顯著優(yōu)于mCCDA培養(yǎng)基。